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    從細胞、組織或酵母中純化至多100 μg的總RNA

    發(fā)布時(shí)間:2014-2-22 12:29:33??????瀏覽次數:

    從細胞、組織或酵母中純化至多100 μg的總RNA

    產(chǎn)品在線(xiàn):http://www.segmentsecurity.com/Product/8051642613.html

    1.數分鐘內快速純化得到高品質(zhì)總RNA

    2.即用型RNA在各種下游應用中表現良好

    3.少量起始樣本,RNA產(chǎn)量穩定

    4.無(wú)需酚/ 氯仿抽提,無(wú)需氯化銫梯度離心,無(wú)氯化鋰或者乙醇沉淀步驟

    RNeasy Mini Kit可從細胞、組織或酵母中快速純化高品質(zhì)RNA,硅膠膜RNeasy離心柱的結合能力達100 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent可方便的穩定組織樣本,使用TissueRuptor或TissueLyser體系可有效的破碎組織??稍赒IAcube全自動(dòng)核酸純化儀上應用RNeasy Mini Kit實(shí)現RNA純化自動(dòng)化。處理更小或更大的樣本,可使用RNeasy Micro Kit(離心柱結合能力為45 μg RNA)、RNeasy Midi Kit(離心柱結合能力為1 mg RNA)和RNeasy Maxi Kit(離心柱結合能力為6 mg RNA)。

    詳細信息:

    性能

    RNeasy Mini Kit可從至多30 mg動(dòng)物或人類(lèi)組織樣本,或從100–1 x 107個(gè)動(dòng)物或人類(lèi)細胞樣本或酵母中純化總RNA。

    RNeasy Mini Kit純化得到的總RNA產(chǎn)量

    樣本來(lái)源

    起始材料

    平均產(chǎn)量(μg

    動(dòng)物細胞
    LMH
    HeLa
    COS-7
    淋巴細胞(未受激)


    1 x 106
    1 x 106
    1 x 106
    1 x 106


    12
    15
    35
    0.5

    小鼠組織



    10 mg
    10 mg
    10 mg


    40
    10
    35

    真菌細胞
    S. cerevisiae


    1 x 107


    25


    原理

    RNeasy Mini Kit可從少量的樣本中高效純化總RNA。RNeasy純化技術(shù)整合了苯酚/異硫氰酸胍裂解的嚴謹性和硅膠膜純化的速度和純度,簡(jiǎn)化了總RNA純化技術(shù)。純化得到高品質(zhì)的RNA,并且DNA殘留水平達到最低。

    操作流程

    RNeasy Mini Kit可從10–1 x 107個(gè)動(dòng)物或人類(lèi)細胞中、0.5–30 mg動(dòng)物或人類(lèi)組織中或小于5 x 107個(gè)酵母細胞中方便的純化總RNA。先對樣本進(jìn)行破碎和勻漿。在裂解物中加入乙醇以提供合適的結合條件。然后將裂解物上樣至RNeasy硅膠膜。RNA結合到膜上(最多可結合100 μg),污染物被高效洗去。對于某些對少量DNA十分敏感的RNA應用,可在RNeasy操作過(guò)程中進(jìn)行柱上DNA酶處理,去除DNA殘留。之后可在30–100 μl的純水洗脫液中得到高濃度的純化RNA。還有各種特殊應用的實(shí)驗方案可供選擇。


    應用

    使用RNeasy技術(shù)純化得到的RNA的A260/280比為1.9–2.1(10 mM Tris-·Cl、pH 7.5的溶液中),適用于多種下游應用,包括:

    1.Northern印跡、點(diǎn)印跡和狹縫印跡

    2.終點(diǎn)式RT-PCR

    3.定量real-time RT-PCR

    4.芯片分析

    5.Poly A+ RNA篩選

    技術(shù)參數:

    特點(diǎn)

    參數

    Applications

    PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray

    Elution volume

    30–100 μl

    Format

    Spin column

    Main sample type

    Tissue, cells

    Processing

    Manual (centrifugation)

    Purification of total RNA, miRNA, poly A+ mRNA, DNA or protein

    Total RNA

    Sample amount

    0.5–30 mg

    Technology

    Silica technology

    Time per run or per prep

    20 minutes

    Yield

    Varies


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