恙蟲(chóng)病（scrub typhus或tsutsugamushi disease），又名叢林斑疹傷寒，是由恙蟲(chóng)病東方體（Orientia tsutsugamsushi，Ot，原稱(chēng)恙蟲(chóng)病立克次體（Rickettsial tsutsugamushioi）所引起的自然疫源性疾病。以鼠類(lèi)為主要傳染源，經(jīng)恙螨幼蟲(chóng)叮咬傳播。臨床以發(fā)熱、焦痂或潰瘍、淋巴結腫大及皮疹為特征，嚴重者可發(fā)生死亡。本病主要流行于熱帶和亞熱帶，東亞各國流行較為廣泛。恙蟲(chóng)病在我國呈廣泛分布，大部分省份都曾有病例報告。我國恙蟲(chóng)病疫情在80年代末期達到高峰，年報告約2500例。1989年后不再列為法定報告傳染病。近年來(lái)許多地區開(kāi)始網(wǎng)絡(luò )直報，全國病例報告數呈上升趨勢，北方地區流行范圍不斷擴大，多次出現局部暴發(fā)疫情。由于醫務(wù)人員對該病缺乏認識，故易發(fā)生誤診和漏診，導致嚴重的并發(fā)癥甚至死亡。為指導臨床醫生和疾病預防控制專(zhuān)業(yè)人員做好該病的發(fā)現、報告、診斷、治療、個(gè)人防護、實(shí)驗室檢測和疫情調查與處置工作，加強公眾健康教育，制定本技術(shù)指南。

     一、目的
    （一）指導各級醫療機構正確開(kāi)展恙蟲(chóng)病的診斷和治療，及時(shí)報告病例。
    （二）指導各級疾病預防控制機構開(kāi)展恙蟲(chóng)病監測、流行病學(xué)調查、實(shí)驗室檢測和疫情控制工作。
     二、疾病概述
    （一）病原學(xué)
    恙蟲(chóng)病病原體是恙蟲(chóng)病東方體，原屬于立克次體科(Rickensieae)的立克次體屬(Rickettsia)，后經(jīng)研究發(fā)現，該病原體的部分生物學(xué)特性明顯不同于該屬其它立克次體，從而將其另立一屬，稱(chēng)東方體屬(Orientia)，將恙蟲(chóng)病立克次體改稱(chēng)為恙蟲(chóng)病東方體。
    1. 生物學(xué)特性
   （1）形態(tài)結構
    恙蟲(chóng)病東方體在宿主細胞的細胞核附近的胞質(zhì)內寄生，行二分裂繁殖。經(jīng)Giemsa或Guneinez染色光鏡下可見(jiàn)立克次體，大小為0.3-0.5μm×1.2-3.0μm，在電鏡下可見(jiàn)其多形態(tài)，呈圓形、橢圓形、短桿狀及啞鈴狀等。
    （2）培養特性
恙蟲(chóng)病東方體的分離和鑒定常采用小白鼠，培養多采用雞胚卵黃囊和組織細胞。雞胚培養時(shí)，多采用7-9日齡，行卵黃囊接種，瀕死收獲即可獲豐富的恙蟲(chóng)病東方體。恙蟲(chóng)病東方體多采用Vero和L929培養。
    2. 恙蟲(chóng)病東方體的分型
   （1）血清型
    恙蟲(chóng)病東方體存在抗原型的多樣性和混合型。迄今為止，世界各地已從患者、媒介昆蟲(chóng)及嚙齒動(dòng)物中分離到百余株恙蟲(chóng)病病原體，公認的標準型為Karp、Kato和Gilliam 3個(gè)血清型，在中國均有分布，據目前文獻報道，我國長(cháng)江以南地區以Karp型為主，長(cháng)江以北地區以Gilliam型居多。
   （2）基因型
    目前恙蟲(chóng)病東方體的基因分型多以56kD表面蛋白基因作為目的基因，基因分型主要包括Karp、Kato、Gilliam、TA763、TA678、TA716、Kawasaki、Kuroki、Shimokoshi等，據現有文獻報道，我國福建、廣東地區以Karp型為主，江蘇北部、山東地區以Kawasaki型為主。
   （二）流行病學(xué)
    1. 宿主動(dòng)物與傳播媒介
    鼠類(lèi)是最重要的儲存宿主，我國目前已在嚙齒目的18種動(dòng)物中發(fā)現恙蟲(chóng)病東方體的自然感染，如黃毛鼠、黑線(xiàn)姬鼠、黃胸鼠等；其次為食蟲(chóng)目動(dòng)物，如臭鼩鼱、四川短尾鼩。此外，兔、豬、貓和禽類(lèi)也能感染。
    本病的傳播媒介是恙螨（Chigger mite），全球已發(fā)現3000多個(gè)種，我國有500多個(gè)種，分布遍及全國。只有少數恙螨能成為恙蟲(chóng)病的傳播媒介，我國已經(jīng)證實(shí)的媒介有地里纖恙螨、小盾纖恙螨、微紅纖恙螨、高湖纖恙螨、海島纖恙螨和吉首纖恙螨等。恙螨一生經(jīng)歷卵、次卵、幼蟲(chóng)、若蛹、若蟲(chóng)、成蛹和成蟲(chóng)7個(gè)時(shí)期，僅幼蟲(chóng)時(shí)期營(yíng)寄生生活，能夠傳播疾病，其它階段都生存于地面淺表層。恙螨活動(dòng)范圍極小，呈點(diǎn)狀分布，聚集于一處，形成“螨島”。
    2. 傳播途徑
本病通過(guò)攜帶恙蟲(chóng)病東方體的恙螨幼蟲(chóng)叮咬傳播。恙螨幼蟲(chóng)孵出后，在地面草叢中活動(dòng)，遇到宿主動(dòng)物或人時(shí)即附著(zhù)其體表叮咬組織液，3-5天吸飽后落于地面。恙螨一生一般只在幼蟲(chóng)期叮咬宿主動(dòng)物一次，獲得東方體后經(jīng)卵垂直傳播，當子代恙螨叮咬人時(shí)傳播本病。
人與人之間不傳染，尚無(wú)接觸危重病人或帶菌動(dòng)物的血液等體液導致傳播的報道。
    3. 人群易感性
人對恙蟲(chóng)病東方體普遍易感，病后可獲得較穩固的免疫力。流行地區居民多經(jīng)感染而獲得免疫，通常表現為散發(fā)，外來(lái)人群進(jìn)入疫區常易發(fā)生流行。
田間勞作的農民、野外作業(yè)人員（伐木、筑路工人、地質(zhì)勘探人員等）、野外訓練部隊和野外旅游者等受恙螨侵襲機會(huì )較多，容易發(fā)生感染。
    4. 地理分布和發(fā)病季節特點(diǎn)
本病主要流行于熱帶和亞熱帶，東亞各國流行較為廣泛，日本、韓國、泰國和澳大利亞等國家報道發(fā)病較多。
恙蟲(chóng)病在我國呈廣泛分布，除內蒙古、青海、寧夏和***外，其余省份都曾有病例報告。我國北方和南方的流行季節有顯著(zhù)差異。長(cháng)江以南地區以6-8月為流行高峰，屬于“夏季型”，宿主動(dòng)物以黃毛鼠、黃胸鼠、褐家鼠和黑線(xiàn)姬鼠為主，主要媒介為地里纖恙螨；長(cháng)江以北地區以10-11月為流行高峰，屬于“秋季型”，宿主動(dòng)物以黑線(xiàn)姬鼠、社鼠和褐家鼠為主，主要媒介為小盾纖恙螨；此外，福建1-2月也曾出現流行高峰，以小盾纖恙螨為主要媒介生物。
   （三）主要病理改變及臨床表現
    1. 病理改變
此病的基本病理變化是全身小血管炎，導致器官的急性間質(zhì)炎、血管性炎和血管周?chē)?。造成?shí)質(zhì)器官的充血、水腫、細胞變性，以致壞死。
    被恙螨叮咬的局部皮膚先有充血、水腫、形成小丘疹，繼而形成水皰，然后壞死和出血，形成黑色痂皮，稱(chēng)為焦痂，焦痂附近的淋巴結腫大。內臟普遍充血，肝脾因充血及網(wǎng)狀內皮細胞增生而腫大，心肌呈局灶性或彌漫性心肌炎，肺有出血性肺炎，腎呈間質(zhì)性炎癥，腦膜可出現淋巴細胞性腦膜炎。
    2. 臨床表現
    本病潛伏期4-21天（一般10-14天）。多急性起病，主要臨床特征為發(fā)熱、特異性焦痂或潰瘍、局部或全身淋巴結腫大、皮疹（充血性、斑疹或斑丘疹）。由于本病造成全身的小血管廣泛受損，可累及多系統多臟器，以呼吸、消化、神經(jīng)系統和腎臟損害較多見(jiàn)。
    發(fā)熱多呈弛張熱或稽留熱，體溫可達38.5～41℃。發(fā)病初期于叮咬處出現紅色丘疹，繼而成為水泡，以后形成黑褐色焦痂?？沙霈F全身淺表淋巴結腫大，以焦痂臨近的局部淋巴結最為明顯。皮疹先于軀干散在性出現，后蔓延至四肢，輕癥患者可無(wú)皮疹，重癥患者皮疹可密集融合，甚至為出血性。
    三、診斷、治療和報告
醫療機構應按照《恙蟲(chóng)病診療技術(shù)要點(diǎn)（試行）》（附件1）做好診斷和治療。
    各級醫療機構發(fā)現符合病例定義的恙蟲(chóng)病疑似、臨床診斷或確診病例時(shí)，可參照乙、丙類(lèi)傳染病的報告要求于24小時(shí)內通過(guò)國家疾病監測信息報告管理系統進(jìn)行網(wǎng)絡(luò )直報，報告疾病類(lèi)別選擇“其它傳染病”中的“恙蟲(chóng)病”。疑似病例應及時(shí)進(jìn)行訂正。符合《國家突發(fā)公共衛生事件相關(guān)信息報告管理工作規范（試行）》要求的，按照相應的規定進(jìn)行報告。
    四、實(shí)驗室檢測
各級疾病預防控制機構專(zhuān)業(yè)人員和臨床醫務(wù)人員發(fā)現病例時(shí)，應認真按照《恙蟲(chóng)病實(shí)驗室檢測方案（試行）》（附件3）進(jìn)行標本的采集、包裝、運送和實(shí)驗室檢測。當地實(shí)驗室無(wú)檢測條件或無(wú)法鑒定時(shí)，可將原始標本及病原分離物送上級疾病預防控制中心進(jìn)行檢測鑒定。
    五、流行病學(xué)調查
當地首次出現恙蟲(chóng)病疫情或發(fā)病水平明顯增高時(shí)，縣區級疾病預防控制中心應按照《恙蟲(chóng)病流行病學(xué)調查方案（試行）》（附件2）立即組織專(zhuān)業(yè)人員開(kāi)展流行病學(xué)調查，主要調查病人的臨床表現、傳染來(lái)源、相關(guān)暴露因素及診療經(jīng)過(guò)等，填寫(xiě)《恙蟲(chóng)病個(gè)案調查表》（見(jiàn)附件2）。
出現暴發(fā)疫情時(shí)，應開(kāi)展病例的主動(dòng)搜索，掌握病例數量及其三間分布，對宿主動(dòng)物、傳播媒介和暴露因素等進(jìn)行調查分析，及時(shí)提出有針對性的預防控制措施。
    六、專(zhuān)題調查
有條件的地區，疾病預防控制機構可根據當地疫情的特點(diǎn)，參照《恙蟲(chóng)病專(zhuān)題調查方案（試行）》（附件4），組織開(kāi)展人群血清流行病學(xué)、宿主動(dòng)物和傳播媒介等方面的專(zhuān)題調查。
    七、預防控制措施
   （一）加強病例的診斷和規范性治療
    各地應開(kāi)展對醫務(wù)人員的培訓工作，提高醫務(wù)人員發(fā)現、識別恙蟲(chóng)病的能力，合理治療，減少危重或死亡病例的發(fā)生。
   （二）宿主動(dòng)物與媒介的控制
    降低環(huán)境中鼠類(lèi)和恙螨密度是控制本病的重要措施，流行地區要持續開(kāi)展愛(ài)國衛生運動(dòng)，經(jīng)常清除居住地、作業(yè)場(chǎng)所及道路兩側的雜草、填平坑洼，以增加日照，降低濕度，使之不適于恙螨的生長(cháng)繁殖。對不能除草的區域可用化學(xué)殺螨劑噴灑。同時(shí)采取以環(huán)境治理為基礎，藥物毒殺為重要手段的綜合措施控制鼠密度。
   （三）做好個(gè)人防護
做好個(gè)人防護是預防本病的有效措施。恙螨主要棲息在草叢或灌木，應避免在此類(lèi)環(huán)境中坐臥休息或晾曬衣被。如需進(jìn)入此類(lèi)地區，尤其是已發(fā)現過(guò)病人的地區，應注意做好個(gè)人防護，應扎緊袖口、褲管口，襯衣扎入褲腰內，減少恙螨的附著(zhù)或叮咬。
    也可在暴露的皮膚和褲腳、領(lǐng)口或袖口上噴涂含鄰苯二甲酸二甲酯或避蚊胺等成分的驅避劑進(jìn)行防護，如驅蚊靈、蚊不叮等。野外作業(yè)后，及時(shí)拍打衣物，抖落附著(zhù)的恙螨；換衣洗澡，重點(diǎn)擦洗腋窩、腰部、會(huì )陰等皮膚柔軟部位，可減少被恙螨叮咬的機會(huì )。
   （四）做好公眾健康教育
    健康教育的要點(diǎn)是指導公眾、特別是高危人群減少或避免恙螨的暴露，以降低感染風(fēng)險。有恙螨叮咬史或野外活動(dòng)史者，一旦出現疑似癥狀或體征，應及早就醫，并告知醫生相關(guān)暴露史。

 

恙蟲(chóng)病診療技術(shù)要點(diǎn)（試行）
為指導各地及時(shí)、有效、規范地開(kāi)展恙蟲(chóng)病的診斷和救治工作，減少危重病例的發(fā)生，特制定本方案。
    1. 臨床表現
    潛伏期為4～21天，一般10～14天。急性起病，主要臨床特點(diǎn)為發(fā)熱、特異性焦痂或潰瘍、淋巴結腫大和皮疹。
    1.1 發(fā)熱：體溫多在38.5～41℃， 最高可達42℃，呈弛張熱或稽留熱，多有畏寒，偶有寒戰。
    1.2 焦痂或潰瘍：是恙蟲(chóng)病特有的體征，發(fā)生率多為50%以上。恙螨幼蟲(chóng)叮咬處首先出現粉紅色小丘疹，約3～10mm大小，其后逐漸變?yōu)樗?，水泡破裂后中心部位發(fā)生壞死，形成褐色或黑色焦痂。焦痂多為圓形或橢圓形，其邊緣稍隆起，周?chē)屑t暈，痂皮脫落后中央凹陷形成小潰瘍，無(wú)膿性分泌物；一般無(wú)痛癢感。焦痂或潰瘍可全身分布，但多見(jiàn)于腋窩、腹股溝、外生殖器、肛門(mén)等隱蔽、潮濕且氣味較濃的部位。多數1個(gè)，偶有2～3個(gè)及10個(gè)以上者。因此仔細查找疑似恙蟲(chóng)病病人的特異性焦痂或潰瘍是臨床診斷恙蟲(chóng)病必須的。
    1.3 淋巴結腫大：全身淺表淋巴結腫大是恙蟲(chóng)病常見(jiàn)的體征之        一，焦痂或潰瘍臨近的淺表淋巴結腫大較為明顯。一般在發(fā)熱前就可以觸到。常見(jiàn)的部位是頸部、腋窩、腹股溝。腫大的淋巴結孤立、游離無(wú)粘連、有壓痛，觸之可動(dòng)，多如黃豆或蠶豆大小、也有鴿蛋大小者，有的甚至于隆起皮膚表面。
    1.4 皮疹：皮疹的發(fā)生率有較大差異，可能與病原體的型別不同、病情輕重、就診早晚等因素有關(guān)。多出現在發(fā)病后3～6天，充血性斑丘疹多見(jiàn)，持續3～7日后逐漸消退。皮疹呈暗紅色，壓之退色。形態(tài)大小不一，一般3～5mm，散在性分布，以胸、背和腹部較多，向四肢發(fā)展，面部很少，手掌腳底無(wú)皮疹。
    1.5 其他表現：全身不適、頭昏頭痛、肌肉酸痛、惡心嘔吐、腹痛腹脹、納差乏力等，可有咳嗽咳痰，肝脾腫大、結膜充血。
    1.6 并發(fā)癥：有支氣管肺炎、腦炎或腦膜炎、中耳炎、腮腺炎、血栓性靜脈炎、肝腎功能損害、心肌炎、心功能不全、DIC、感染性休克等，孕婦可發(fā)生流產(chǎn)。死亡病例多發(fā)生于病程的第2～3周。
    2. 實(shí)驗室檢查  
    2.1 血常規：白細胞計數多正常，中性粒細胞分類(lèi)正?；驕p少，淋巴細胞分類(lèi)增多或正常，可有單核細胞分類(lèi)增多或血小板減少。
    2.2 尿常規：尿液中常見(jiàn)少量蛋白、白細胞、紅細胞或上皮細胞，
    2.3 生化表現：肝功能正?；蜉p度異常，可有心肌酶譜異常，血沉或C反應蛋白升高。
    2.4 外斐氏試驗：?jiǎn)畏菅錙XK效價(jià)≥1:160有診斷意義。病程第一周，一般僅1/3的病例呈陽(yáng)性反應，第二周陽(yáng)性率可達90%，至第四周后陽(yáng)性率又開(kāi)始下降，2～3個(gè)月后轉為陰性。
    2.5 間接免疫熒光試驗　檢測病人血清中的特異性IgM、IgG抗體。病程第一周末即可檢出特異性抗體，至第二、三周陽(yáng)性率最高，兩月后逐漸下降，但仍維持一定水平達數年之久。如果同時(shí)檢測雙份血清，IgG抗體滴度4倍及以上升高即可診斷。單份血清IgM抗體滴度≥1:32、IgG抗體滴度≥1:64有診斷意義。
    2.6 分子生物學(xué)檢測：PCR檢測恙蟲(chóng)病東方體特異基因片段，具有敏感性高和特異性強的優(yōu)點(diǎn)，可用于早期診斷。
    2.7 病原體分離：取發(fā)熱期患者血液0.5～1ml，接種小鼠腹腔、雞胚或細胞，培養分離病原體。
    3. 病例診斷
依據流行病學(xué)史、臨床表現和實(shí)驗室結果進(jìn)行診斷。在恙蟲(chóng)病流行區內、流行季節時(shí)，凡是有不明原因發(fā)熱或淋巴結腫大者，應考慮恙蟲(chóng)病可能。
    3.1 流行病學(xué)史
流行季節，發(fā)病前3周內曾在或到過(guò)恙蟲(chóng)病流行區，并有野外活動(dòng)史，主要有田間勞作、農村垂釣、野營(yíng)訓練、草地坐臥、接觸和使用秸桿等。
    3.2 臨床表現
   3.2.1發(fā)熱
   3.2.2淋巴結腫大
   3.2.3皮疹
   3.2.4特異性焦痂或潰瘍
    3.3 實(shí)驗室檢查
   3.3.1外斐氏試驗陽(yáng)性：?jiǎn)畏菅錙XK效價(jià)≥1:160；
   3.3.2間接免疫熒光試驗陽(yáng)性：雙份血清IgG抗體滴度4倍及以上升高；
   3.3.3 PCR核酸檢測陽(yáng)性
   3.3.4分離到病原體
    4. 診斷標準
    4.1 疑似病例
具備3.1和3.2.1，加3.2.2、3.2.3任何一條，且明確排除其他疾??；
或無(wú)法獲得明確的流行病學(xué)史，在流行季節同時(shí)具備3.2.1、3.2.2和   3.2.3三項；
4.2 臨床診斷病例
疑似病例加3.2.4；
或同時(shí)具備3.1、3.2.1、3.2.4三項；
4.3 實(shí)驗室診斷病例
疑似病例加3.3.2、3.3.3、3.3.4中的任何一項；
或臨床診斷病例加3.3中的任何一項；
5. 鑒別診斷
本病應與傷寒、斑疹傷寒、鉤端螺旋體病、流行性出血熱等疾病相鑒別。
5.1 斑疹傷寒：多見(jiàn)于冬春季節，無(wú)焦痂和局部淋巴結腫大，外斐氏試驗OX19陽(yáng)性，OXk陰性。流行性斑疹傷寒患者，普氏立克次體為抗原的補體結合試驗陽(yáng)性。地方性斑疹傷寒患者，莫氏立克次體為抗原的補體結合試驗陽(yáng)性。
5.2 登革熱：急性起病，有高熱、頭痛、皮疹。外周血白細胞和/或血小板明顯減少，血清中登革病毒抗體陽(yáng)性。
5.3 流行性出血熱：起病急，典型表現有發(fā)熱、出血、腎臟損害。外周血白細胞增多或正常，血小板減少，蛋白尿。流行性出血熱病毒抗體陽(yáng)性。
5.4 瘧疾：在流行季節有流行區居住或旅行史，出現間歇性或規律性發(fā)作的寒戰、高熱、大汗，伴有貧血和肝脾腫大，惡性瘧熱型不規則，可引起兇險發(fā)作。外周血或骨髓涂片瘧原蟲(chóng)陽(yáng)性。
5.5 鉤端螺旋體?。喊l(fā)病前有疫水接觸史，眼結膜充血、出血，腓腸肌疼痛明顯，無(wú)焦痂和潰瘍。血清鉤端螺旋體凝集溶解試驗陽(yáng)性。
5.6 傳染性單核細胞增多癥：青少年多見(jiàn)，有發(fā)熱、淋巴結腫大、咽痛、皮疹，外周血單核細胞增多，可見(jiàn)異常淋巴細胞，嗜異凝集試驗陽(yáng)性，EB病毒抗體陽(yáng)性。
5.7 傷寒：起病緩慢，表情淡漠，相對緩脈，胸、腹皮膚可見(jiàn)玫瑰疹，無(wú)焦痂與潰瘍。標本中培養出傷寒桿菌，肥達氏反應陽(yáng)性，外斐氏試驗陰性。
5.8 皮膚炭疽：有牲畜接觸史，毒血癥狀較輕，外周血白細胞計數多增高。潰瘍性黑色焦痂多位于面、頸、手或前臂等暴露部位，取焦痂或潰瘍的分泌物染色鏡檢可發(fā)現炭疽桿菌。
5.9 粟粒性肺結核：由結核桿菌發(fā)生血行播散引起，臨床表現復雜而無(wú)特異性，但通常有結核病的全身中毒癥狀，臨床表現為發(fā)熱、肝脾腫大、淋巴結腫大等。
5.10 敗血癥：全身中毒癥狀明顯，外周血白細胞計數明顯增多，中性粒細胞核左移，血培養陽(yáng)性。
6. 治療
6.1 一般治療
患者應臥床休息，加強營(yíng)養，進(jìn)食流質(zhì)或半流質(zhì)食物；注意多飲水，保持水、電解質(zhì)、酸堿和能量平衡；加強護理和觀(guān)察，以便盡早發(fā)現各種并發(fā)癥。
6.2 病原治療
恙蟲(chóng)病東方體為專(zhuān)性細胞內寄生，應選用脂溶性抗生素。β-內酰胺類(lèi)抗生素及氨基糖苷類(lèi)對恙蟲(chóng)病的治療無(wú)效。目前臨床上較常應用的抗生素有強力霉素、大環(huán)內酯類(lèi)、喹諾酮類(lèi)和氯霉素，一般以多西環(huán)素為首選。
6.2.1 強力霉素
目前較常應用的是強力霉素（多西環(huán)素類(lèi)）：成人100mg，每12小時(shí)口服1次，退熱后100mg/d頓服；8歲以上小兒每日2.2mg/kg，每12小時(shí)1次，退熱后按體重2.2mg/kg，每日口服1次。
強力霉素可引起惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉等胃腸道反應, 肝功能損害, 脂肪肝變性, 同時(shí)應注意過(guò)敏反應的發(fā)生。孕婦不宜服用強力霉素，8歲以下兒童禁止服用強力霉素。
6.2.2 大環(huán)內酯類(lèi)
常用的是羅紅霉素、克拉霉素和阿奇霉素。
羅紅霉素：成人每次150mg，1日2次，退熱后150mg/d頓服；兒童每次2.5～5mg/kg，1日2次，退熱后劑量減半。
克拉霉素：成人每次500mg，每12小時(shí)1次，6個(gè)月以上的兒童每次7.5mg/kg，每12小時(shí)口服1次。
阿奇霉素：成人每次500mg頓服，退熱后250mg/d頓服，兒童10 mg/kg（1日量最大不超過(guò)500mg）頓服，退熱后劑量減半，亦可靜脈滴注阿奇霉素。
大環(huán)內酯類(lèi)的主要不良反應為惡心、腹痛、腹瀉、肝功能異常(ALT及AST升高)、頭暈和頭痛等。孕婦及哺乳期婦女需慎用。
6.2.3 氯霉素：成人患者2g/d，分4次口服，退熱后0.5g/d，分2次口服；危重病人亦可靜脈滴注。兒童每日25～50mg/kg，分3～4次服用；新生兒每日不超過(guò)25 mg/kg，分4次服用。
氯霉素類(lèi)可引起外周血白細胞和血小板減少，有可能誘發(fā)不可逆性再生障礙性貧血、溶血性貧血、過(guò)敏反應等。在泰國、緬甸和我國都曾發(fā)現對氯霉素耐藥的恙蟲(chóng)病東方體株。
根據病人的情況選用上述3類(lèi)藥物，療程均為7～10日，療程短于7日者，可出現復發(fā)。復發(fā)者療程宜適當延長(cháng)3～4日。
6.3 對癥治療
高熱者可予物理降溫、解熱鎮痛藥。密切觀(guān)察病情變化，出現相關(guān)并發(fā)癥時(shí)加強對癥、支持處理，病情危重者可進(jìn)行重癥監護治療。應慎用激素，但中毒癥狀明顯的重癥患者，在使用有效抗菌素的情況下，可適當使用激素。
7. 病人管理
不需要對病人實(shí)施隔離。
8. 預后
早期選用有效的抗生素治療，預后良好，極少發(fā)生死亡。高齡、孕婦、有其他慢性疾病者預后相對較差。

 

恙蟲(chóng)病流行病學(xué)調查方案（試行）
為做好恙蟲(chóng)病疫情的流行病學(xué)調查，準確描述疫情分布和分析危險因素，科學(xué)制訂防控策略和措施，特制定本方案。
一、調查目的
（一）了解病例臨床特征、暴露史和感染危險因素。
（二）為核實(shí)診斷和制定有針對性防控措施提供依據。
二、調查內容和方法
（一）個(gè)案調查和標本采集
發(fā)現恙蟲(chóng)病病例后，應及時(shí)開(kāi)展流行病學(xué)個(gè)案調查。調查內容包括病例的基本情況、發(fā)病情況、就診經(jīng)過(guò)、臨床表現及實(shí)驗室檢查、診斷、轉歸、活動(dòng)史和暴露史、家庭及居住環(huán)境等（見(jiàn)附表《恙蟲(chóng)病個(gè)案調查表》），并采集相關(guān)標本（見(jiàn)附件3《恙蟲(chóng)病實(shí)驗室檢測方案（試行）》）。
1. 基本情況
包括年齡、性別、住址、職業(yè)和文化程度等。
2．臨床資料
通過(guò)查閱病歷及化驗記錄、詢(xún)問(wèn)經(jīng)治醫生及病例、病例家屬等方法，詳細了解病例的發(fā)病經(jīng)過(guò)、就診情況、臨床表現、實(shí)驗室檢查結果、診斷、治療、疾病進(jìn)展、轉歸等情況。
3. 病例家庭及居住環(huán)境情況
通過(guò)詢(xún)問(wèn)及現場(chǎng)調查，了解病例情況、家庭居住位置、環(huán)境等。
4. 暴露史及病例發(fā)病前活動(dòng)范圍
詢(xún)問(wèn)病例發(fā)病前3周內勞動(dòng)、旅行或可疑暴露史，了解其是否到過(guò)有恙螨生長(cháng)的場(chǎng)所、防護情況，是否有恙螨叮咬史。
（二）暴發(fā)調查
出現暴發(fā)疫情時(shí)，應注意調查感染來(lái)源，組織疾控和醫療機構專(zhuān)業(yè)人員，采用查看醫療機構門(mén)診日志、住院病歷等臨床資料、入戶(hù)調查等方式，開(kāi)展病例的主動(dòng)搜索，并對搜索出的疑似病例進(jìn)行篩查、隨訪(fǎng)，必要時(shí)采集相關(guān)標本進(jìn)行檢測。
通過(guò)查閱資料、咨詢(xún)當地相關(guān)部門(mén)等方法，了解當地自然生態(tài)環(huán)境、媒介分布，以及相關(guān)的人口、氣象、生產(chǎn)、生活資料等情況，特別是發(fā)病高峰前3周內當地的莊稼收種等農事活動(dòng)情況等。
三、調查要求
（一）調查者及調查對象
應由經(jīng)過(guò)培訓的當地疾病預防控制機構專(zhuān)業(yè)人員擔任調查員?，F場(chǎng)調查時(shí)，應盡可能直接對病人進(jìn)行訪(fǎng)視、詢(xún)問(wèn)。如病人病情較重或其他原因無(wú)法直接調查時(shí)，可通過(guò)其醫生、親友、同事或其他知情者進(jìn)行調查、核實(shí)或補充。
（二）調查時(shí)間及調查內容。
應在接到疫情報告后迅速開(kāi)展流行病學(xué)調查，調查內容見(jiàn)附表《恙蟲(chóng)病個(gè)案調查表》。調查表應填寫(xiě)完整，實(shí)驗室檢測結果、病人轉歸等情況應及時(shí)填補到調查表中，以完善相關(guān)信息。
（三）調查者的個(gè)人防護。
在到農田、池塘、草地等高危場(chǎng)所進(jìn)行現場(chǎng)流行病學(xué)調查時(shí)，調查者應采取相應的個(gè)人防護措施，避免恙螨叮咬。
四、調查資料的分析、總結和利用
（一）在疫情調查處理進(jìn)程中或結束后，應及時(shí)對流行病學(xué)調查資料進(jìn)行整理、分析，撰寫(xiě)調查報告，并及時(shí)向上級疾病預防控制機構及同級衛生行政部門(mén)報告。
（二）省級疾病預防控制機構在接到當地疾控機構報告后，應及時(shí)將疫情調查報告上報中國疾病預防控制中心。
（三）疫情調查結束后，相關(guān)疾病預防控制機構應將流行病學(xué)調查的原始資料、分析結果及調查報告及時(shí)整理歸檔。
附表 恙蟲(chóng)病流行病學(xué)個(gè)案調查表
地區國標編碼口口口口口口口口
1．一般情況
1.1姓名： （若為14歲以下兒童，家長(cháng)姓名： ）

1.2性別： ①男 ②女
1.3年齡： （歲）

1.4職業(yè)：
①幼托兒童 ②散居兒童 ③學(xué)生 ④教師 ⑤保育員 ⑥餐飲食品人員 ⑦公共場(chǎng)所服務(wù)員 ⑧商務(wù)人員 ⑨醫務(wù)人員 ○10工人 ○11民工 ○12農民 ○13牧民 ○14漁(船)民 ○15海員及長(cháng)途駕駛員 ○16公務(wù)人員及職員 ○17離退人員 ○18家政家務(wù)及待業(yè) ○19不詳 ○20其他
1.5文化程度：
①學(xué)齡前兒童 ②文盲 ③小學(xué) ④初中 ⑤高中 ⑥大學(xué)及以上 ⑦不詳

1.6現住址：
1.7工作/學(xué)習單位：

1.8聯(lián)系電話(huà)：

2．發(fā)病情況

2.1發(fā)病日期： 年 月 日
2.2發(fā)病地點(diǎn)：

2.3首診時(shí)間： 年 月 日
2.4首診單位：

2.5首診疾?。?（病名）
2.6是否入院： ①否 ②是（入院時(shí)間： 年 月 日；出院時(shí)間： 年 月 日）

3．臨床資料
3.1臨床表現
3.1.1發(fā)熱：①有 ②無(wú)
3.1.1.1發(fā)熱持續 天，最高體溫 . ℃
3.1.1.3熱型：  ①稽留熱  ②馳張熱  ③不規則

3.1.2寒戰：  ①有  ②無(wú)
3.1.3頭痛：  ①有  ②無(wú)
3.1.4結膜充血：  ①有  ②無(wú)

3.1.5皮疹：  ①有  ②無(wú)
3.1.6特異性焦痂和潰瘍：  ①有（數目 個(gè)）  ②無(wú)
3.1.6.1部位（多選）：①腹股溝 ②肛周 ③會(huì )陰 ④腘窩 ⑤腋窩
⑥胸部（或乳房） ⑦腰帶壓迫部 ⑧背部 ⑨其它
3.1.7 淋巴結腫大： ①有 ②無(wú)
3.1.7.1主要部位（共用3.1.6.1選項）口口口口
3.1.8 有無(wú)下列表現：

脾大 口  肝大 口  譫妄 口  昏迷 口  嘔吐 口
3.2有無(wú)下列并發(fā)癥？
支氣管肺炎 口  心肌炎 口  心力衰竭 口
其它（注明）：
3.4實(shí)驗室檢測結果
3.4.1臨床檢驗結果
（1）血常規檢測
檢測日期  白細胞計數
（×109/升）  中性粒細胞（%）  淋巴細胞
（%）  嗜酸性粒細胞
（%）  紅細胞計數
（109/升）  血小板計數
（109/升）  其它
              
              
              
（2）尿常規/腎功檢測
檢測日期  尿蛋白  白細胞  紅細胞  肌酐
（μmol/L）  尿素氮（mmol/L）  其它
            
            
（3）肝功能檢測
丙氨酸轉氨酶ALT： U/L 天門(mén)冬氨酸轉氨酶AST： U/L
總膽紅素TBLL： μmol/L 直接膽紅素DBLL： μmol/L
（4）血沉： mm/h  C反應蛋白： mg/L
（5）外斐氏反應：檢測日期 年 月 日，檢測結果：①陽(yáng)性 ②陰性

3.4.2 特異性檢測
檢測日期  檢測單位  標本類(lèi)型  檢測方法*  檢測結果  備注
          
          
          
*①間接免疫熒光試驗 ②PCR ③病原體分離 ④其它（注明具體方法）
4．暴露及危險因素（發(fā)病前3周內）
4.1外出或旅游史： ①有(何地 ) ②無(wú)
4.2有無(wú)下列戶(hù)外活動(dòng)：（頻次：①經(jīng)常 ②偶爾 ③無(wú) ④不詳）
戶(hù)外活動(dòng)種類(lèi)  具體地點(diǎn)1  頻次1*  具體地點(diǎn)2  頻次2*  具體地點(diǎn)3  頻次3*
①田間作業(yè)            
②放牧            
③接觸柴禾            
④釣魚(yú)            
⑤野營(yíng)訓練            
⑥坐臥草地            
⑦野外或公園晨練            
⑧草地晾曬衣物            
⑨其它1             
其它2             
其它3             
4.3 居住環(huán)境
4.3.1 居住位置  ①村邊 ②村中
4.3.2 住房類(lèi)型  ①樓房 ②平房 ③草房
4.3.3 院內地面  ①水泥地 ②泥地生長(cháng)雜草 ③泥地無(wú)雜草
4.3.4 屋內是否堆放雜草或農作物  ①是 ②否
4.3.5 院內是否堆放雜草或農作物  ①是 ②否
4.3.6 住宅附近（20米內）是否有草地、菜地或溝塘? ①是 ②否
4.4 是否飼養家禽、家畜?  ①是  ②否
4.4.1家禽家畜是否養在居住屋內?  ①是(動(dòng)物種類(lèi) )  ②否
4.5 家庭是否有鼠類(lèi)活動(dòng)? ①經(jīng)常 ②偶爾 ③無(wú) ④不詳
4.6 近期家中有無(wú)類(lèi)似癥狀病人 ①有 ②無(wú) ③不詳
5．最終診斷
5.1 病人轉歸：①痊愈 ②死亡

5.2 診斷疾?。?（病名）
5.3 診斷類(lèi)型：①實(shí)驗室診斷 ②臨床診斷 ③疑似
5.4 診斷醫院：
5.5 診斷時(shí)間 年 月 日

調 查 者： 調查日期： 審核者：

恙蟲(chóng)病實(shí)驗室檢測方案（試行）
為保證及時(shí)、科學(xué)地采集、運送恙蟲(chóng)病病例及疫源地調查的各種類(lèi)型標本，規范恙蟲(chóng)病的實(shí)驗室檢測程序，提高檢測質(zhì)量，為明確診斷或開(kāi)展相關(guān)的科學(xué)研究提供實(shí)驗室依據，特制定本方案。
一、樣本采集對象
（一） 恙蟲(chóng)病病例
（二） 鼠類(lèi)
（三） 媒介恙螨
二、標本種類(lèi)及采集方法
（一） 病例標本
1．全血標本
急性期病人需采集全血，常用EDTA或枸櫞酸鹽（適用于PCR檢測）或肝素（適用于細胞分離培養）抗凝真空采血管采集血液3～5ml，用于病原分離及PCR檢測。應盡可能在病人使用抗生素前進(jìn)行血液標本的采集。
2．血清標本
用無(wú)菌真空采血管，采集病人非抗凝血3～5ml，用于血清抗體檢測。采集后，應及時(shí)分離血清；血清標本可暫時(shí)于4℃保存，若超過(guò)48小時(shí)，需-20℃保存。急性期血清盡可能在發(fā)病后1周內采集，發(fā)病2～4周內，采集恢復期血清（血凝塊于-20℃保存備用）。
3．病人焦痂
將病人焦痂取下后放入1.5ml無(wú)菌離心管中，-20℃保存，用于PCR檢測。
（二）鼠類(lèi)標本采集
用注射器無(wú)菌操作采集鼠心臟血、股動(dòng)脈或腋下靜脈血，用于IgG抗體檢測。采用無(wú)菌方法解剖鼠，取其脾、肝、腎標本，置入相應編號的無(wú)菌凍存管內，應盡快送回實(shí)驗室分離病原體。否則應置于液氮罐內或－80℃超低溫冰箱內保存。
（三）恙螨標本的采集
將捕獲的鼠處死后，齊耳根剪下鼠耳，放入編號的凍存管內，帶回實(shí)驗室，4℃冰箱放置3~5天，讓恙螨自行爬下，切忌硬挑使標本受到破壞。待恙螨幼蟲(chóng)爬下后，在解剖鏡下將鼠耳上的恙螨全部挑入盛有蒸餾水的培養皿中，每只鼠耳的恙螨放一培養皿，計數，將不同外部形態(tài)的恙螨按抽取一定比例，用改良的幼蟲(chóng)封藏液（阿拉伯樹(shù)膠25 g，蒸餾水35 ml，水合氯醛35 g，甘油12 ml，50%葡萄糖漿3 ml）封片，鑒定種類(lèi)，統計恙螨種類(lèi)組成；其余恙螨經(jīng)初步鑒定分類(lèi)后，以50-100只同種恙螨為1組，分別用含青霉素和鏈霉素的生理鹽水洗滌數次后，研磨制成懸液，立即接種小鼠分離恙蟲(chóng)病東方體。如進(jìn)行PCR檢測，恙螨于-80℃或-20℃冰箱中保存。
三、標本采集和保存注意事項
標本采集應符合無(wú)菌操作要求。用于病原培養分離的各種標本應立即接種小白鼠?？鼓绮荒芰⒓创策吔臃N，應置于4℃環(huán)境保存（不超過(guò)3天），避免冰凍。非抗凝血應及時(shí)分離血清。
標本采集后，應認真填寫(xiě)采樣登記表（見(jiàn)附件4中附表）。
四、實(shí)驗室檢測
（一）血清學(xué)檢測
恙蟲(chóng)病的血清學(xué)檢測方法較多，目前應用較廣的主要有外斐氏反應和間接免疫熒光試驗。
1. 外斐氏反應
是用變形桿菌OXK抗原檢測血清抗恙蟲(chóng)病東方體抗體，方法簡(jiǎn)單、快速，方便基層使用，但特異性較差。OXK≥1:160有診斷意義。一般于病程第一周僅1/3的病例呈陽(yáng)性反應，至第二周陽(yáng)性率可達90%，至第四周后陽(yáng)性率又開(kāi)始下降，2～3個(gè)月后轉為陰性。
2. 間接免疫熒光試驗
特異性和靈敏度均較高，是國際上通用的血清學(xué)檢測方法，有條件的實(shí)驗室可采用該方法進(jìn)行血清學(xué)診斷。病程第一周末即可檢出特異性抗體，至第二、三周陽(yáng)性率最高，兩月后逐漸下降，但仍維持一定水平達數年之久。如同時(shí)檢測雙份血清，IgG抗體滴度4倍及以上升高，可診斷為恙蟲(chóng)病東方體感染。單份血清IgM抗體滴度≥1:32、IgG抗體滴度≥1:64有診斷意義。
（二）PCR檢測
PCR技術(shù)可成功地應用于檢測臨床標本中的恙蟲(chóng)病東方體DNA，靈敏度和特異性好，擴增產(chǎn)物可測序驗證，是一種簡(jiǎn)便、可靠的早期診斷方法。實(shí)際應用中，焦痂標本PCR擴增陽(yáng)性率較高。
1. DNA提取
使用市售的商品化試劑盒提取DNA。
2. 巢式PCR檢測
恙蟲(chóng)病東方體56kDa蛋白基因的開(kāi)放讀碼框架為1600nt左右，是PCR檢測最常用的擴增靶基因，巢式PCR檢測可提高檢測靈敏度和特異度。PCR檢測應分區進(jìn)行，避免污染。使用引物序列見(jiàn)表1。
表1 巢式PCR檢測恙蟲(chóng)病東方體引物
引物  序 列  擴增片段
a  5'- TACATTAGCTGCGGGTATGACA-3'  306～339bp
b  5'- CCAGCATAATTCTTCAACCAAG-3'  
a′  5'- GAGCAGAGCTAGGTGTTATGTA-3'  150～168bp
b′  5'- TAGGCATTATAGTAGGCTGAGG-3'  
PCR反應混合物的準備按常規進(jìn)行。第一輪反應采用外引物對a和b，DNA模板5μl。PCR反應體系總體積為25μl，其它成分的濃度按常規進(jìn)行。反應程序如下：
表2 巢式PCR檢測恙蟲(chóng)病東方體反應參數
循環(huán)數  變性94℃  退火溫度第一、二輪均選50 ℃  延伸72℃
1  5 min    
35  1 min  1 min  1 min
1      5 min
第二輪反應使用引物對a′、b′進(jìn)行巢式PCR。檢測樣本取第一輪產(chǎn)物1～2μl為模板，陽(yáng)性對照取1μl為模板。反應程序同第一輪反應。
電泳：擴增產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳。
結果判定：凝膠成像系統讀取結果，若在150-168bp處出現擴增條帶，則所檢樣品為陽(yáng)性，即初步判斷有恙蟲(chóng)病東方體DNA檢出，進(jìn)一步確定應將擴增產(chǎn)物測序驗證。
（三）病原體分離培養。
恙蟲(chóng)病東方體是專(zhuān)性細胞內寄生菌，其分離培養有直接動(dòng)物分離、雞胚培養和組織細胞培養。
1．動(dòng)物分離
常用小白鼠作為接種的實(shí)驗動(dòng)物。采集的標本可直接進(jìn)行小鼠腹腔接種，臨床病人采用床邊接種小鼠的方法分離率最高。采集全血分離病原體的操作步驟如下：
（1）使用肝素抗凝真空采血管從患者靜脈采血3-5毫升，取0.5毫升立即接種小鼠腹腔，每份血液注射2～3只，若不能立即接種，置于4℃保存。
（2）注射畢，置于籠內飼養，每日觀(guān)察其發(fā)病情況。被接種鼠多在14～19天內死亡。鼠死前呈現顯著(zhù)病態(tài)，如皮毛松豎，不活潑，閉目，腹部膨大，有波動(dòng)，呼吸短促、急迫等現象。解剖肉眼觀(guān)察，腹腔內常積有大量滲出液，脾腫大，淋巴結腫大和皮下充血常見(jiàn)。采用環(huán)磷酰胺處理過(guò)的小鼠可提高恙蟲(chóng)病東方體弱毒株的分離效果。具體方法為，接種標本約48小時(shí)前給每只小鼠注射環(huán)磷酰胺2mg，接種標本約72小時(shí)后再給小鼠注射環(huán)磷酰胺2mg。
（3）病原體檢查 用腹水涂片或脾臟印片，姬姆薩染色，在油鏡下觀(guān)察，若在單核細胞的細胞核周?chē)l(fā)現有一些成簇存在的顆粒，其形態(tài)多為球狀或短桿狀，顏色與細胞核染色相同，呈紅色至紫紅色，即可判斷為病原體檢查陽(yáng)性（圖1）。

圖1 恙蟲(chóng)病東方體感染小鼠腹膜Giemsa染色形態(tài)（1000×）
2．組織細胞分離
恙蟲(chóng)病東方體可感染多種細胞，常用的細胞有Vero、Hela、L929等，可取臨床標本直接接種細胞，或發(fā)病小鼠取腹水、肝、脾或腎研磨制成懸液接種細胞。細胞分離恙蟲(chóng)病東方體應注意嚴格無(wú)菌操作。以L(fǎng)929細胞為例，分離恙蟲(chóng)病東方體的操作步驟如下：
（1）按常規方法培養細胞，將長(cháng)成單層的L929細胞瓶?jì)鹊呐囵B液吸凈，用RPMI 1640洗兩次后，再把RPMI 1640吸凈。
（2）新鮮抗凝的血液標本取0.5ml，加入上述洗滌過(guò)的L929單層細胞培養瓶?jì)?，加入生長(cháng)液5ml，置34℃二氧化碳培養箱內孵育12小時(shí)，換維持液（2%血清）后繼續培養。
（3）對-80℃低溫冰箱或液氮中凍存的標本，取出，待血液自管壁分離后倒入無(wú)菌離心管內，逐次加入冷肝素PBS（20U/ml），使其完全解凍，1500rpm離心5min，棄去上清液。
（4）于盛標本的離心管中加入0.1ml蔗糖磷酸鹽緩沖液，將沉淀物充分混勻后吸出，入上述洗滌過(guò)的L929單層細胞培養瓶?jì)?，?4℃二氧化碳培養箱內孵育1小時(shí)，取出加入生長(cháng)液5ml，再放回34℃二氧化碳培養箱內繼續孵育過(guò)夜，次日取出，吸出生長(cháng)液，換入維持液（2%血清）繼續孵育，每3天換維持液一次，共孵育7～10天。
3．雞胚培養 恙蟲(chóng)病東方體可接種至7～9日齡雞胚的卵黃囊中，并能在其中生長(cháng)，在雞胚瀕死時(shí)收獲卵黃囊膜，可獲得繁殖豐富的菌體。
病原體的鑒定：細胞培養物觀(guān)察細胞病變，感染細胞涂片姬姆薩染色檢查，各種培養物可通過(guò)特異引物進(jìn)行PCR鑒定。
五、生物安全
在標本采集、運輸及實(shí)驗室工作過(guò)程中，生物安全應參照《病原微生物實(shí)驗室生物安全管理條例》中的有關(guān)要求進(jìn)行。
（一）實(shí)驗室生物安全
標本滅活、病原DNA標本提取及病原體分離操作應在生物安全Ⅱ級實(shí)驗室進(jìn)行。非感染性材料的檢測可在生物安全I級實(shí)驗室進(jìn)行。
（二）血液標本采集安全注意事項
采集病例的標本時(shí)，應做好個(gè)人防護。
（三）采集動(dòng)物宿主與媒介恙螨標本個(gè)人防護
野外采集標本時(shí)，應穿著(zhù)顏色明亮的防護服，并將衣袖或褲管口扎緊以防蜱螨等昆蟲(chóng)叮咬。野外作業(yè)或活動(dòng)的人員可使用驅避劑或防蚊油噴涂皮膚。
（四）標本運輸安全注意事項
應參照《病原微生物實(shí)驗室生物安全管理條例》中的有關(guān)要求（B類(lèi)）進(jìn)行。
（五）在診療及標本的采集、包裝和實(shí)驗室檢測等過(guò)程中所產(chǎn)生的醫療廢物，應按照《醫療廢物管理條例》和《醫療衛生機構醫療廢物管理辦法》等相關(guān)規定處理。

恙蟲(chóng)病專(zhuān)題調查方案（試行）
為指導發(fā)生疫情的地區開(kāi)展恙蟲(chóng)病的疫源地調查，了解我國恙蟲(chóng)病自然疫源地的分布情況，同時(shí)增進(jìn)對該病病原學(xué)、傳播機制及危險因素等的認識，為制訂相應的防控策略和措施提供科學(xué)依據，特制訂本方案。
一、調查目的
（一）了解恙蟲(chóng)病疫區人群感染狀況及抗體水平。
（二）了解當地鼠類(lèi)的種類(lèi)、密度及帶菌狀況。
（三）了解當地恙蟲(chóng)病傳播的主要恙螨種類(lèi)、數量、分布及帶菌狀況。
二、調查內容與方法
（一）人群血清流行病學(xué)調查
1. 調查方法
各地根據當地情況，采集疫區部分人群血清。每次采集非抗凝靜脈血5ml，分離血清，檢測IgG抗體并對陽(yáng)性標本做倍比稀釋?zhuān)瑱z測滴度。血清標本的包裝、貯存、運送及檢測見(jiàn)《恙蟲(chóng)病實(shí)驗室檢測方案（試行）》（附件3）。
2. 資料的分析與利用
根據檢測結果計算調查人群的血清抗體陽(yáng)性率和抗體水平（幾何平均滴度），分析人群既往感染的情況。
（二）宿主動(dòng)物調查
1. 調查地點(diǎn)和時(shí)間
在病例可能感染的地點(diǎn)，或根據當地的地理景觀(guān)和生境，選擇宿主動(dòng)物調查的地點(diǎn)。調查時(shí)間可選擇在疫情發(fā)生后或宿主動(dòng)物活動(dòng)高峰季節。
2. 鼠類(lèi)捕獲及密度調查
推薦采用籠夜法進(jìn)行。
（1）居民區：每個(gè)居民區按方位選擇20戶(hù)以上居民，于傍晚每戶(hù)放置5個(gè)（鼠籠盡量放置家中不同房間），連續放置3天，每日清晨取回捕獲鼠的鼠籠，放入白色布袋內，系緊袋口，做好記錄，并編號。誘餌用花生米或油條、油餅等（同一地區應選用同一種誘餌）。
（2）野外：在野外不同生境放置300籠次以上，于傍晚時(shí)布放鼠籠，行距應在30m以上，籠間距為5m，并做好標記。誘餌應統一。次日清晨取回鼠籠，將捕獲鼠的鼠籠放入白色布袋內，系緊袋口，做好標記，并編號。
3. 動(dòng)物的分類(lèi)、鑒定
參考《中國重要醫學(xué)動(dòng)物鑒定手冊》等相關(guān)專(zhuān)業(yè)資料，鑒定宿主動(dòng)物的種類(lèi)、學(xué)名等。
4. 標本采集及處理
（1）體表寄生物檢查
將鼠置于密閉容器內，用乙醚麻醉。將鼠置于白瓷盤(pán)中，梳子梳理鼠類(lèi)體毛，用稍濕的毛筆將掉在瓷盤(pán)中的寄生物，如蚤、蜱、螨等，同一只鼠的寄生物按類(lèi)別分別置入盛有75％乙醇的凍存管中，并標記相應鼠只的編號，以待鑒定，如果需要對寄生物進(jìn)行病原學(xué)分離，應直接將寄生物研碎后接種小白鼠。
（2）采血
用注射器無(wú)菌操作采集鼠心臟血、股動(dòng)脈或腋下靜脈非抗凝血，用于IgG抗體檢測。
（3）采集內臟標本
采用無(wú)菌方法解剖鼠，取其脾、肝、腎標本，置入相應編號的無(wú)菌凍存管內，送回實(shí)驗室后立即分離病原體。否則應置于液氮罐內或－80℃超低溫冰箱內保存。
5. 核酸檢測及病原分離
（1）采用PCR檢測鼠類(lèi)標本中的恙蟲(chóng)病東方體DNA，測定核苷酸序列。
（2）有條件的實(shí)驗室應對陽(yáng)性標本進(jìn)行病原體分離與鑒定。陽(yáng)性病原分離物可送中國疾病預防控制中心作進(jìn)一步鑒定。
方法見(jiàn)附件3《恙蟲(chóng)病實(shí)驗室檢測方案（試行）》。
6. 計算不同生境的鼠種構成及鼠密度，鼠類(lèi)的帶菌率。
（三）媒介恙螨的調查
1. 調查地點(diǎn)和時(shí)間
在病例可能感染的地點(diǎn)，或根據當地的地理景觀(guān)選擇媒介恙螨的調查地點(diǎn)。調查時(shí)間可選擇在疫情發(fā)生后，或恙螨活動(dòng)高峰季節。
2. 采集方法
（1）檢查宿主動(dòng)物
主要捕捉野鼠進(jìn)行調查，具體捕鼠方法參見(jiàn)前。將捕獲的鼠處死后，齊耳根剪下鼠耳，放入編號的凍存管內，帶回實(shí)驗室，4℃冰箱放置3~5天，讓恙螨自行爬下，切忌硬挑使標本受到破壞。待恙螨幼蟲(chóng)爬下后，在解剖鏡下將鼠耳上的恙螨全部挑入盛有蒸餾水的培養皿中，每只鼠耳的恙螨放一培養皿，計數，將不同外部形態(tài)的恙螨按抽取一定比例，用改良的幼蟲(chóng)封藏液封片、鑒定；其余恙螨經(jīng)初步鑒定分類(lèi)后，以50-100只同種恙螨為1組，分別用含青霉素和鏈霉素的生理鹽水洗滌數次后，研磨制成懸液，立即接種小鼠分離恙蟲(chóng)病東方體。如進(jìn)行PCR檢測，恙螨于-80℃或-20℃冰箱中保存。根據調查結果計算出鼠的帶恙螨率和帶恙螨指數。
帶恙螨率（%）=帶恙螨鼠數/捕鼠總數×100%
帶恙螨指數=鼠體恙螨總數/捕鼠總數
（2）小黑板法
流行季時(shí)，選擇晴天9-11時(shí)或14-16時(shí)，將小黑板（15cm×15cm×0.5cm）平放在草地等可能有恙螨的地點(diǎn)，每個(gè)點(diǎn)2塊，10min檢查一次。檢查時(shí)用手握住板的兩個(gè)對角，按自下而上，自左至右的順序觀(guān)察板的正面和側面。在板面上發(fā)現的恙螨幼蟲(chóng)似粉筆灰大小，呈淡紅色，近似圓形，有3對足，爬行緩慢，肉眼可見(jiàn)。然后用稍濕的細毛筆將幼蟲(chóng)挑入含75%乙醇的凍存管內保存待查。采集標本人員應注意個(gè)人防護。根據調查結果計算出小黑板的帶恙螨率和帶恙螨指數。
帶恙螨率（%）=帶恙螨小黑板數/放小黑板總數×100%
帶恙螨指數=采集恙螨總數/放小黑板總數
3. 恙螨的分類(lèi)、鑒定
參考有關(guān)專(zhuān)業(yè)資料，對采集的恙螨進(jìn)行分類(lèi)和鑒定。若當地無(wú)法鑒定，可將采集到的恙螨若干只置于75%乙醇溶液中保存，送中國疾病預防控制中心傳染病所鑒定。
4. 恙蟲(chóng)病東方體核酸檢測及病原分離
（1）采用PCR擴增恙螨標本的恙蟲(chóng)病東方體DNA，并測定核苷酸序列。
（2）有條件的實(shí)驗室應對恙螨標本進(jìn)行病原分離和鑒定。陽(yáng)性病原分離物可送中國疾病預防控制中心作進(jìn)一步鑒定。
方法見(jiàn)附件3《恙蟲(chóng)病實(shí)驗室檢測方案（試行）》。
5. 計算恙螨種的構成、總帶菌率及各種恙螨的帶菌率。
三、資料的收集、管理和利用
（一）一般背景資料的收集
收集當地的一般背景資料，如調查時(shí)當地的氣象資料（氣溫、降雨量、濕度等）、地理狀況（地理位置、地形、地貌、湖泊、河流、流域等）、人口統計學(xué)資料、生產(chǎn)及生活方式（農、牧業(yè)、狩獵等活動(dòng)）、生活及衛生習慣、特殊風(fēng)俗、社會(huì )經(jīng)濟狀況以及其他相關(guān)資料等。
（二）資料的收集、管理和利用
收集專(zhuān)題調查的相關(guān)資料，包括各種采樣登記表、檢測登記表、檢測報告等（附表1-8）。
現場(chǎng)調查結束后，應及時(shí)撰寫(xiě)專(zhuān)題調查報告，上報上級疾控機構及同級衛生行政部門(mén)，并將專(zhuān)題調查的原始記錄、匯總整理資料、分析數據及調查報告等及時(shí)整理、歸檔。實(shí)驗室檢測工作結束后，應及時(shí)將檢測結果反饋給當地疾病預防控制機構，由當地疾病預防控制機構告知相關(guān)單位及被調查者。